表达H3N2亚型猪流感病毒NP基因重组腺病毒的构建
以含有猪流感病毒A/Swine/Guangdong/9/2005(H3N2)NP基因的重组质粒pMD18-NP为模板,利用带特定酶切位点的引物PCR扩增NP基因,将其亚克隆质粒pIRES2-EGFP中,再次将含有NP及EGFP的基因片段克隆到腺病毒的穿梭质粒pDC315,构建重组穿梭质粒pDC315-NP-EGFP。利用脂质体转染方法将穿梭质粒pDC315-NP-EGFP和腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,E3Cre共转染HEK293细胞,基于腺病毒感染后形成的典型细胞病变及EGFP基因在细胞中的表达筛选到重组腺病毒rAd-NP-EGFP。经PCR和Westem-blot鉴定,结果表明NP基因已被重组到腺病毒的基因组中,并能够伴随病毒的复制而表达,表达蛋白具有良好的生物性活性。
猪流感病毒 NP基因 重组腺病毒 生物活性
展小过 乔传玲 陈艳 杨焕良 孔维 吴运谱 辛晓光 陈化兰
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医物技术国家重点实验室农业部动物流感重点开放实验室,哈尔滨黑龙江 150001
国内会议
南宁
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639-642
2009-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）