不同代次的猪细小病毒(PPVs-1株)NS1基因的克隆与序列分析
根据GenBank中猪细小病毒PPV NADL-2株NS1序列设计了一对引物,以本课题组保存的PPVS-1分离株不同传代代次的DNA为模板,进行PCR扩增,将扩增产物分别克隆到pGEM-T载体中进行测序。结果表明,扩增片段长约2.2kb,包含完整的NS1基因,共编码662个氨基酸。应用DNAStar软件进行序列分析,结果显示所有代次的Ns1核苷酸同源性在99.4％以上,氨基酸同源性在98.5％以上;PPVS-1分离株在传代致弱的过程中,NS1基因出现了一些变异,有4处较为一致的突变,即1052位的C-T、1636位G-A、1717位A-G、1732位T-G,对应的氨基酸变化分别为Thr351-+Met351、Val546-+Met546、Asn573-Asp573、Ser578-Ala578,可能是PPVS-1在ST细胞上传代致弱的分子基础之一。
猪细小病毒 NS1基因 序列分析 PCR扩增 传代致弱
谢巧 李春华 张婉华 王英 蒋凤英 张春玲
上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海 201106 江西农业大学南昌 330045 上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海 201106
国内会议
南宁
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735-738
2009-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）