青天葵总DNA的提取与随机扩增多态性DNA反应条件的建立
目的：建立并优化青天葵样品总DNA提取方法及随机扩增多态性DNA(RAPD)反应。 方法：采用改进的高盐低pH法提取青天葵鲜叶和药材样品，通过正交设计和均匀设计，改变反应体系和扩增程序优化随机扩增多态性DNA。 结果：使用高盐低pH值法可较好地提取新鲜叶片的DNA，药材叶片含杂质较多，但都能用于RAPD。反应体系为：缓冲液2.0μl，0.5μl dNTP(各2.5mmol·L-1)，0.8 μl Mg2+(25 mmol·L-1)，0.5 μl引物(20pmol·μl-1)，0.2 μl Taq酶(5U·μ1-1)，1 μl DNA(50 ng)，1 μl BSA(20 mg·ml-1)，加双倍蒸馏水至20 μl。扩增程序为：94℃预变性3 min；94℃变性30 s，40℃退火30 s，72℃延伸60 s，40个循环；72℃延伸5 min。 结论：建立并优化了的青天葵样品总DNA提取方法及RAPD反应体系。
青天葵 DNA提取 RAPD反应体系 随机扩增多态性DNA 正交设计 均匀设计
杜勤 魏智强 田军
广州中医药大学中药学院，广东 广州 510405
国内会议
成都
中文
194-196
2009-08-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）