戊型肝炎病毒荧光定量RT-PCR快速检测技术的建立和初步应用

摘要：

利用DNAMAN软件对GenBank登录的戊型肝炎病毒四个主要基因型代表株的序列进行分析,选择其高度保守的ORF3区域设计合成引物和探针,并扩增约0.3kb核苷酸片段进行体外转录制备标准品cRNA,对荧光定量PCR的反应条件进行了优化,建立了适用于戊型肝炎病毒主要基因型检测的通用荧光定量RT-PCR检测方法。利用该检测方法可检测Ⅰ型和Ⅳ型戊型肝炎的阳性病料,同时与常规巢式RT-PCR方法比较表明,所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR灵敏度可达2.0×101拷贝/反应,比巢式RT-PCR方法灵敏度高10-100倍以上。在对54份临床样品的检测中,进一步证实了该方法快速、灵敏且重复性好,可满足戊型肝炎病毒早期快速诊断的需要。

关键词： 戊型肝炎病毒 荧光定量 快速检测 基因型检测

作者: 乔彩霞 张伟 段向英 张鹤晓 赖平安 高志强 汪琳 蒲静 吴丹 柏亚铎 谷强

作者单位: 北京出入境检验检疫局 北京 101113

会议类型: 国内会议

会议名称: 2008年京津冀畜牧兽医科技创新交流会暨新思想、新观点、新方法论坛

会议地点: 河北保定

会议语种:中文

页码: 301-307

在线出版日期: 2008-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）