荧光RT-PCR检测鱼类鲤春病毒血症病毒的研究

摘要：

本研究根据鲤春病毒血症病毒的核酸保守区序列,开发、设计多条引物和探针序列,从中筛选敏感、特异的引物、探针,在循环参数、病毒核酸提取方法及逆转录条件优化的基础上,建立了快速的检测鲤春病病毒的荧光RT-PCR检测技术。同时,又将该方法与一步法RT-PCR方法和细胞查毒方法进行了互相验证和对比研究,结果表明荧光RT-PCR方法检测病毒悬液的灵敏度最高,病毒悬液10-6稀释仍然可以检出,而细胞分离病毒方法测得的TCID50为10-4.本文还通过对北京地区出口渔场送检样品的检测和对人工实验感染该病毒鱼的病料进行了组织脏器中病毒分布和病毒含量的研究。结果显示病毒致死鱼的肠道病毒含量最高,肠组织研磨稀释10-4倍仍然可以检出；其次是肾和鳃组织,检出极限为稀释10-3倍组织悬液；肉和脑组织中病毒含量较低,肉最高能检出10-2倍组织悬液,而脑组织只能检出10-1倍组织稀释液。

关键词： 鲤春病毒 血症病毒 细胞分离 荧光检测 探针序列

作者: 张利峰 张鹤晓 王姝 段向英 乔卫虹 吴丹

作者单位: 北京出入境检验检疫局 北京 100026 北京市水产技术推广站 北京 100021

会议类型: 国内会议

会议名称: 2008年京津冀畜牧兽医科技创新交流会暨新思想、新观点、新方法论坛

会议地点: 河北保定

会议语种:中文

页码: 330-335

在线出版日期: 2008-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）