3种食物中毒性弧菌毒素基因的融合与表达
本研究采用柔性Linker序列(GGGGS)和重叠延伸PCR方法,对副溶血弧菌的耐热型直接溶血素基因tdh、创伤弧菌的溶细胞毒素基因vvhA和拟态弧菌的热不稳定型溶血素基因vmhA的结构基因片段进行串联,得到多联融合毒素基因tdh-vvhA-vmhA(命名为FT),其开放阅读框架全长3225 bp,与GenBank序列一致性达99%。将FT克隆至表达载体pET-22b(+),转入E.coli BL21(DE3),用终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导表达并优化条件,经SDS-PAGE电泳及薄层扫描分析,融合蛋白分子量约为120.4ku,37℃诱导4h表达量约为11.49%,主要以包涵体形式存在。本实验多联融合毒素的成功表达,为下一步建立食物中毒性弧菌广谱、快速、特异的免疫学检测方法奠定了基础。
食物中毒 融合毒素 弧菌检验 基因表达
李月婷 任洪林 饶星 柳增善 卢士英
吉林大学畜牧兽医学院人兽共患病研究所教育部人兽共患病重点实验室,长春 130062
国内会议
北京
中文
113-116
2008-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)