体外诱导人骨髓间充质干细胞向角膜上皮细胞分化的初步研究
目的: 探讨在体外损伤微环境下,人骨髓间质干细胞诱导分化为角膜上皮细胞的可行性。 方法:体外分离培养人骨髓间质干细胞(hMSCs)和人角膜缘干细胞(hLSCs),用免疫细胞化学法和流式细胞术检测培养的hMSCs CD34、CD44的表达情况;细胞角蛋白3(CK3)和细胞角蛋白19(CKl9)免疫细胞化学法对培养的hLSCs进行鉴定。采用逆转录病毒载体介导法,以增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)基因为标记基因,转染培养的hMSCs。将近融合的hLSCs,经47℃高温处理造成热损伤体外模型,再加入荧光标记的hMSCs共同培养,荧光显微镜下观察。用CK19免疫细胞化学法检测共同培养的细胞。 结果:培养的hMSCs呈克隆样生长,CD44表达阳性、CD34表达阴性,流式细胞术结果显示培养的hMSCs CD44阳率为92.59％,CD34阳性率为0.01％。培养的hLSCs免疫细胞化学结果显示CK19表达阳性,CK3表达阴性。共同培养后部分hMSCs CK19表达阳性,并有多核细胞现象。 结论:在损伤微环境下,hMSCs可以转化类角膜上皮细胞的细胞,在此过程中存在细胞融合现象。
人骨髓间质干细胞 人角膜缘干细胞 诱导分化 细胞融合 免疫细胞化学 损伤微环境
顾绍峰 洪晶 付小兵
北京大学第三医院眼科中心 解放军304医院全军烧伤研究所基础部
国内会议
第四届全国再生医学(干细胞与组织工程)学术研讨会暨全国人体干细胞移植技术临床应用管理高层研讨会、第一届中华医学会医学工程学分会干细胞工程专业委员会学术年会
北京
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2008-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）