N-Ras shRNA抑制二羟环氧苯并芘恶性转化细胞增殖
目的：检测环境致癌物苯并(a)芘代谢物二羟环氧苯并芘(BPDE)对人支气管上皮细胞Ras基因家族表达的影响，并用小发夹RNA(smallhairpin RNA，shRNA)干扰技术探讨N-Ras基因过表达对BPDE转化人支气管上皮细胞(16HBE-T)恶性表型的影响。方法：以溶剂处理的16HBE-T细胞为对照组，BPDE恶性转化16HBE-T细胞为实验组，利用RT-PCR和Western blotting检测Ras基因家族在mRNA和蛋白水平表达变化。以shRNA干扰技术(RNA interference，RNAi)建立N-Ras稳定沉默16HBE-T细胞模型，检测细胞周期时相，并以软琼脂实验和裸鼠成瘤实验进行细胞表型分析。结果：RT-PCR和Western blotting实验表明，BPDE恶性转化细胞H-Ras、 K-Ras和N-Ras mRNA和蛋白表达水平都升高，N-Ras升高最显著。流式细胞分析发现稳定沉默N-Ras基因表达诱导转化细胞Go/G1期捕获，软琼脂实验和裸鼠成瘤实验发现稳定沉默N-Ras基因降低体外恶性转化细胞的集落形成率，抑制体内肿瘤细胞生长。结论：BPDE诱发人支气管上皮细胞恶性转化存在H-Ras、K-Ras和N-Ras基因过表达。N-Ras基因沉默可以降低转化细胞的细胞周期进程和细胞恶性性状表型，提示N-Ras基因在BPDE诱导细胞恶变中具有重要作用，N-Ras可成为肺癌潜在的基因治疗靶点。
环境毒理 二羟环氧苯并芘 小发夹RNA RNA干扰
蒋义国 周兰兰 沈月兰 刘林华
广州医学院化学致癌研究所，广东，广州 510182
国内会议
中国毒理学会放射毒理专委会联合免疫毒理专委会、中国环境诱变剂学会致突、致畸、致癌专委会2008年全国学术会议
兰州
中文
259-266
2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）