三种中药单体成分对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后卵裂效果的影响
卵母细胞是胚胎工程技术研究中重要的实验材料之一，研究和建立卵母细胞体外成熟培养方法，可以充分利用屠宰动物的卵巢资源，为体外胚胎生产、核移植.胚胎干细胞等的研究提供大量优质卵母细胞。目前，大量的研究人员就有关卵母细胞基础成熟液、卵巢运输温度、卵母细胞获取方法、卵泡直径、卵丘细胞包裹层数以及卵母细胞成熟培养过程中添加的激素、血清、生长因子等对卵母细胞的影响方面做了大量的研究，但有关中药单体成分对猪卵母细胞体外成熟方面的作用还未有报道。由于中药成分具有低毒副作用、无抗药性、相对安全、不良反应少，能从整体性、多靶点、全方位改善机体生理状态等特点，越来越受到国内外研究学者的广泛关注。本实验室研究表明中药单体成分黄芪多糖(APS)、川穹嗪(Lig)、小檗碱(BR)、淫羊藿苷(Ica)等对小鼠2-细胞胚胎发育具有明显的促进作用，且在囊胚发育率，胚胎孵化率、孵化胚胎细胞数目等方面均显著好于未加中药成分的对照组。为探讨中药单体成分川芎嗪、小檗碱和淫羊藿苷对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后卵裂效果的影响，本试验以猪卵母细胞为材料，以mTcM-199为对照组，以mTcM199中分别添加小、中、大三个浓度的三种中药单体成分Lig(Lig1、Lig2、Lig3).腿(BR1、BR2、BR3)和Ica(Ica 1、Ica2、Ica3)为试验组。将选出的A、B级卵母细胞分别置于各组成熟培养液中进行体外培养，44h后观察卵母细胞的成熟情况。将体外成熟的卵母细胞去除颗粒细胞后，采用NCSU-23液联合离子霉素和6-二甲基嘌呤的激活方法进行卵母细胞的孤雌激活，将激活后的胚胎分别置于NCSU-23胚胎培养液中继续培养，培养48h后观察胚胎卵裂率。试验结果表明：在猪卵母细胞体外成熟培养过程中，以第一极体排出作为猪卵母细胞体外成熟判断标准，卵母细胞成熟率Lig1，Ica3.BR3显著高于时照组(71.15％、73.18％、77.27％vs 58.61)(P＜0.05)，卵裂率Lig1、Ica3、BR3显著高于对照组(65.90％、64.80％、67.19％vs53.29％)(P＜0.05)，三个最佳浓度组间差异不显著。试验表明，中药单体成分促进猪卵母细胞体外发育的效果是客观存在的，但其对猪卵母细胞的体外成熟及孤雌激活后发育的作用机理尚且不清楚，还有待今后进一步研究。
中药单体 卵母细胞 体外成熟 孤雌激活 卵裂效果 猪胚胎培养
赵墨 张志刚 李冬冬 徐捷 赵菊 相荣科 高建明
北京农学院动物科学技术系
国内会议
青岛
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2008-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）