会议专题

Smac/DIABLO过表达对人结肠癌细胞凋亡的影响

背景:Smac/DIABLO是一种线粒体促凋亡蛋白,研究表明其在结肠癌细胞中表达降低。 目的:研究Smac/DIABLO对人结肠癌细胞生长的影响及其可能的促凋亡机制。 方法:将pcDNA3.1-Smac质粒或pcDNA3.1空质粒以脂质体转染入人结肠癌细胞株LoVo,以未转染细胞作为空白对照。以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测SmacmRNA.表达,蛋白质印迹法检测Smac蛋白表达,Hoechst 33258染色观察凋亡细胞核形态学变化,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞分析检测细胞凋亡率, PI染色流式细胞分析检测细胞周期,Caspase-3检测试剂盒检测Caspase-3活性。 结果:pcDNA3.1=Smac质粒转染12 h后,LoVo细胞Smac mRNA表达增加;转染48 h后,Smac蛋白表达增加。转染48 h后,Smac组LoVo细胞呈现明显凋亡细胞核形态学特征,凋亡率显著高于LoVo细胞组和空质粒组,G0/G1期细胞增多,Caspase-3活性亦显著高于空质粒组(P<0.05)。 结论:Smac/DIABLO可激活caspase-3途径,抑制人结肠癌细胞生长,促进细胞凋亡,使胞周期阻滞于G0/G1期。

结肠肿瘤 Smac/DIABLO蛋白 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 细胞凋亡 细胞周期

高飞 郭文 王继德

南方医科大学南方医院消化内科研究所 510515

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2008-06-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)