转染VEGF165基因的血管内皮祖细胞移植治疗慢性深静脉血栓的实验研究
下肢深静脉血栓是血管外科常见病、多发病，可能导致股青肿、血栓后综合征以及严重的肺栓塞，是危害人类健康和影响生活质量的疾病。近年，随着腔内血管外科技术的飞速发展，ATD消融，超声消融，Oasis吸栓术，straub消融术等腔内介入治疗技术相继在该病的治疗中得到广泛应用，这些方法对7天之内的急性期血栓疗效较好，但对于慢性期血栓，不论介入、手术取栓还是药物溶栓都难以获得很好效果，仍然存在较高的血栓后综合征的发生率，其症状的改善还是靠其漫长的自身机化和再通过程。因此，这类疾病患者的治疗一直是困扰血管外科医生的难题。本研究目的是利用pAdEasy系统构建携有血管内皮生长因子165(VEGF165)的重组腺病毒载体：Ad-VEGF165。Ficoll法分离骨髓单个核细胞，EBM-2MV培养基培养扩增大鼠骨髓源性EPCs并对其进行鉴定。观察EPCs体外培养特点和生物学特性。 Ad-VEGF165体外转染兔EPCs，并观察细胞内VEGF蛋白表达情况及Ad-VECF165对EPCs的生长影响。转染Ad-VEGFl65的EPCs移植于慢性深静脉血栓模型，观察基因转染组在促进血栓机化和再通方面是否优于未转染组及空白对照组。 本研究成功地构建了携带VEGF165基因的重组腺病毒载体。通过Ficoll法分离骨髓单个核细胞，EBM-2MV培养基成功培养扩增大鼠骨髓源性EPCs，培养的EPCs生长状态良好，增殖活性强，并能保持内皮细胞特性。 Ad-VEGF165能有效转染EPCs，并有较强的促EPC:增殖和分化的能力，基因在细胞内和细胞外均能有效表达。转染VEGF165能促进移植EPCs在血栓局部存活，并能改EPCs质量，能明显促进血拴新生血管生成，加快血栓机化和再通，较单独EPCs移植具有更大的优越性。
血管内皮生长因子 内皮祖细胞移植 基因转染 重组腺病毒载体 下肢深静脉血栓 血栓机化
孟庆友 雷锋锐 李晓强
国内会议
第三届全国血管外科和组织工程学术会议暨第二届全国下肢血管疾病论坛
武汉
中文
54-55
2008-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）