HIF-1α和gaz基因共转染对移植静脉内膜重塑态的效应与分子机制研究
目的：探讨缺氧诱导基因(HIF-1a)和同源盒基因(gax)过表达对移植静脉内膜过度增生的影响。 方法：动物模型的建立：Wistar大鼠28只(中国医科大学实验动物部提供)，雌雄不拘，体重(250±40)g，只，3个月龄。随机分为基因转染组(A组)和非基因转染组(B组)，每组14只。均行自体右颈内静脉移植至左颈总动脉术”1”。其一，A组切取下的静脉置于高滴度的含有HIF-1acDNA的重组腺伴随病毒(rAAV)工作液中(rAW-HIF-1a为2×10 11v.g/ml)，0℃～4℃下体外孵育45min，B组与A组不同之处是工作液中为空载rAVV。其二，静脉吻合术后，A组是在移植静脉及其吻合口周围涂布含有rAVV-gax(gaxcDNA 15.g/mL，rAVV-gax 2×1011v.g/mL)30％凝胶(F127)，B组仅用空载rAVV凝胶涂布。术后分笼标记统一饲养。标本制作：术后14d切取移植静脉，二组动物均分别随机选择6只大鼠的移植血管冻存，用于RT-PCR和Western Blot蛋白印迹检测;2只大鼠移植血管置于2.5％戊二醛中固定，4℃保存，用于电镜观察;6只大鼠移植血管以10％中性福尔马林固定，24h内行石醋包埋，连续切片，片厚4/μm备用。于核酸、蛋白、细胞超微结构及细胞形态层次分析移植静脉中HIF-1a和gax基因表达、血管平滑肌细胞(VSMC)表型、肌-内皮连接结构、原位末端标记(TUNEL)阳性细胞及静脉内膜、中膜厚度等。 结果：基因转染组与非基因转染组比较：HIF-1a和gax mRNA及其蛋白表达增强(P<0.05);增殖型VSMC和增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞减少(P<0.05);TUNEL阳性细胞增多(P<0.05);内皮修复较显著，较多肌-内皮边接结构形成;内膜过度增生程度有所减弱。 结论：HIF-1a和gax基因联合转染对移植静脉内膜过度增生具有一定的抑制作用。
移植静脉 内膜重塑态 缺氧诱导基因 同源盒基因 基因治疗
杨镛 罗开元 何晓明 陆平 杨国凯
云南省第二人民医院云南省血管外科中心 650021
国内会议
第三届全国血管外科和组织工程学术会议暨第二届全国下肢血管疾病论坛
武汉
中文
64-68
2008-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）