Tet-on系统在鸡胚成纤维细胞中诱导表达条件的优化

摘要：

Tet-on系统是一种高效无毒、具有严密开/关功能的基因调控系统。脂质体转染法是较为常用的将外源基因转入细胞的方法，在转染过程中，很多因素会影响脂质体的转染效率，为了尽可能提高转染率及外源基因的表达水平，试验中对转染及诱导表达条件进行了优化。结果表明：当pBI-EGFP-EGFP：pCAGGS-rtTA2s-M2为1∶2，质粒DNA：LjpofectemineTM2000为1∶2.5，转染后6h加入Dox终浓度为1μg/mL，诱导12h可获得较为满意的表达水平，转染率可达(32.0±3.1)％。Tet-on系统在鸡胚成纤维细胞中的有效转染及GFP的高效表达，为下一步在CEF中进行外源目的基因的功能研究奠定了良好的基础。

关键词： Tet-on系统 鸡 成纤维细胞 诱导表达 基因调控

作者: 龚萍 李亦然 王雪峰 杨宇 杨永平 俸艳萍 李世军 彭秀丽 龚炎长

作者单位: 华中农业大学动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室，武汉 430070 华中农业大学动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室，武汉430070 华中农业大学动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室，武汉

会议类型: 国内会议

会议名称: 第十四届全国家禽科学学术讨论会

会议地点: 哈尔滨

会议语种:中文

页码: 63-67

在线出版日期: 2009-06-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）