Lentivirus介导表达多基因的人胚基因工程神经干细胞实验研究

摘要：

目的：探索以Lentivirus为载体，构建同时携带并表达多基因的基因工程人胚神经干细胞(Human Neural stem cell，hNSC)的可行性，以便为脊髓损伤研究提供材料。 方法：①分离、培养和鉴定hNSC：②用携带绿色荧光蛋白(Green Fluorescence Protein，GFP)和NT-3的lentivirus转染hNSC；③用荧光显微镜观察、鼠胚背根神经结培养(Dorsal RootGanglion，DRG)和Slot blot等方法检测基因工程hNSC的多基因表达。 结果：①获得了大量的hNSC；②荧光显微镜观察到几乎100％的hNSC表达GFP：③基因工程hNSC的培养液能促使DRG旺盛生长；④Slot blot检测到基因工程HNSC能高效分泌NT-3蛋白。 结论：成功构建了同时携带并稳定表达多基因的基因工程hNSC，为脊髓损伤基础研究及进一步临床应用提供有价值的细胞资源，具有广阔应用前景。

关键词： Lentivirus 人胚神经干细胞 基因工程 神经营养因子-3 绿色荧光蛋白 脊髓损伤

作者: 蔡培强 汤逊 林月秋 M.OUDEGA B.BLITS 阳运康 徐林 周田华

作者单位: 成都军区昆明总医院骨科 昆明 650032 The Miami Project to Cure Paralysis，University of Miami School of Medicine，Miami，FL 33101，USA Graduate School forNeurosciencesAmsterdam，Netherlands Institute for Brain Research， Amsterdam，The N 中国科学院昆明动物研究所 昆明 650032

会议类型: 国内会议

会议名称: 第四届全国解剖与临床学术研讨会

会议地点: 昆明

会议语种:中文

页码: 255-258

在线出版日期: 2006-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）