Lentivirus 介导分泌NT-3的鼠胚基因工程神经干细胞构建及表达研究

摘要：

目的：以Lentivirus为载体，构建同时表达GFP和NT-3的鼠胚基因工程NSC，以便为脊髓损伤研究提供材料。 方法：①培养和鉴定胎鼠神经干细胞(Neural stem cell， NSC)：②用携带绿色荧光蛋白(Green Fluorescence Protein，GFP)和NT-3的lentivirus转染NSC；③用荧光显微镜、鼠胚背根神经结培养(Dorsal Root Ganglion，DRG)、Western blot等方法检测基因工程NSC的转基因表达。 结果：①获得了大量的基因工程NSC；②荧光显微镜观察到几乎100％的基因工程NSC表达GFP；③基因工程NSC的培养液能促使DRG旺盛生长；④Westernblot检测到基因工程NSC能高效分泌NT-3蛋白。 结论：成功构建了同时携带并稳定表达GFP和NT-3的鼠胚基因工程NSC，为脊髓损伤基础研究提供有价值的细胞资源，同时为未来的临床研究奠定基础。

关键词： Lentivirus 神经干细胞 基因工程 神经营养因子-3 绿色荧光蛋白

作者: 蔡培强 汤逊 林月秋 M.OUDEGA B.BLITS 阳运康 徐林 周田华

作者单位: 成都军区昆明总医院骨科 昆明 650032 The Miami Project to Cure Paralysis，University of Miami School of Medicine，Miami，FL 33101，USA Graduate School forNeurosciences Amsterdam，Netherlands Institute for Brajn Research， Amsterdam，The 中国科学院昆明动物研究所 昆明 650032

会议类型: 国内会议

会议名称: 第四届全国解剖与临床学术研讨会

会议地点: 昆明

会议语种:中文

页码: 259-262

在线出版日期: 2006-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）