脑脊液HCVE1巢式荧光定量RT-PCR诊断方法的建立和应用研究
目的:建立脑脊液丙型肝炎病毒(HCVE1)巢式荧光定量RT-PCR检测方法,为快速、准确地定量检测脑脊液HCV奠定基础。 方法:根据HCV基因序列,设计并合成引物和荧光标记探针。将PCR扩增的HCV基因片段克隆入载体,重组质粒经筛选、鉴定后,作为阳性模板,用于标准曲线的制定和样品检测。 结果:应用重组质粒制作的定量曲线循环阈值与模板具有良好的线性关系,相关系数为0.943,建立了检测HCV的巢式逆转录荧光定量PCR方法。检测36例HCV感染患者及26例健康人脑脊液中HCVE1,5例HCV感染患者呈阳性,其余均为阴性。 结论:荧光定量套式RT-PCR方法能够避免PCR后处理导致的假阳性污染,并实现准确定量,对于进一步研究HCV对中枢神经系统损伤具有很好的应用价值。
丙型肝炎病毒 脑脊液 巢式荧光定量 RT-PCR检测 鉴别诊断
王振海 刘建 张颖 谢鹏 孔繁元
宁夏医科大学附属医院神经内科宁夏银川市750004 重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆市400016
国内会议
石家庄
中文
125-129
2008-10-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)