猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)SD2株ORF5/ORF6基因克隆及双基因真核表达载体的构建
本研究根据哺乳动物细胞真核表达载体pIRES MCSA MCSB多克隆位点的序列和猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5ORF6基因阅读框架,并在基因起始密码子前面加入Kozak序列,分别设计了针对ORF5ORF6的引物P5s/P5r,P6s/P6r。以病毒细胞培养物为模板,经RT-PCR扩增得到ORF5ORF6基因,ORF5ORF6PCR产物和pIRES分别经双酶切,连接构建pIRES-ORF5ORF6.经PCR、双酶切鉴定和测序证明成功构建了转移载体pIRES-ORF5ORF6.测得的ORFSORF6序列与VR-2332株的氨基酸同源性分别为99％和100％,仍属北美洲型。构建成功的转移栽体pIRES-ORF5ORF6可作为防治PRRS的核酸疫苗,并可作为转移栽体在哺乳动物细胞中同时翻译表达两个蛋白,为进一步为PRRS的防治提供亚单位疫苗打下基础。
猪场防疫 核酸疫苗 病毒鉴定 基因表达
李俊 王金宝 袁小远 崔尚金 李曦 符芳 周艳君
山东省农业科学院畜牧兽医研究所,济南,250100 山东省农业科学家禽研究所,济南,250100 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,哈尔滨,150001
国内会议
济南
中文
268-273
2007-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）