新型磁性微球的制备及在植物基因组DNA提取中的应用
从植物中提取出高纯度结构完整的基因组DNA是进行植物遗传学研究及转基因检测等分子生物学分析所必需的条件，传统的酚氯仿抽提取方法操作步骤繁琐，不仅浪费有机试剂，还对操作者和环境造成毒害。基于磁性微球的DNA固相提取法具有无毒害、简单、快速、可应用于高通量等特点，具有广泛的应用前景，制备一种磁响应性强、生物相容性好的新型磁性微球成为获得高质量基因组DNA的关键。 本工作首先将铁盐沉积法在多孔SiO2微球的孔内，通过灼烧得到Fe2O3-SiO2复合微球，再还原获得Fe3O4-SiO2复合磁性微球。为了防止使用过程中磁性物质泄漏，以及力求为微球下一步应用提供良好的生物兼容表面，采用Stober水解法，在微球表面包覆SiO2层。Fe3O4-SiO2磁性微球的扫描电子显微镜图显示这种方法制备的磁性微球粒径均一、分散性良好。采用振动磁强计对磁性粒子进行了磁性能的测定，四氧化三铁含量为22％的磁性微球饱和磁化率为18.15 emu/g，磁滞为3.338 emu/g。进而将这种磁性微球应用于玉米、小麦、大豆、豌豆、青菜、番茄、青椒等植物的基因组DNA的提取，经过裂解、磁吸附、洗涤、洗脱等步骤提取的基因组DNA纯度高、片段完整。对植物管家基因ndhB进行PCR扩增，可得到长度为1kb的目的片段。PCR结果表明磁性微球法提取的各种植物基因组DNA可满足后续的分子生物学检测需要，对于植物转基因检测和遗传多态性分析等方面有重意义。
磁性微球 植物基因组 DNA提取 转基因检测
石若冰 胡云丽 薛芸 万谦宏 陈磊
天津大学药物科学与技术学院,天津 300072
国内会议
长沙
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953-954
2009-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）