miRNA表达载体的构建与抑制禽流感病毒(AIV)复制的研究
miRNA是一类内源性的长约21nt～25nt的短序列非编码单链RNA，可以通过部分互补或者完全互补结合到目的靶mRNA，以诱发蛋白质翻译抑制(翻译抑制子)或者介导目的mRNA的降解调节基因表达。根据这一特性，设计靶向禽流感病毒的miRNA编码序列，使之与靶mRNA完全互补。将其克隆到pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR载体中，构建单个或多个串联miRNA表达载体，分别为pcDNA6.2/NP、pcDNA6.2/PA、pcDNA6.2/PB2、pcDNA6.2/PA+NP和pcDNA6.2/PA+NP+PB2。鉴定正确后，将重组质粒转染MDCK细胞，禽流感病毒A/Goose/Guangdong1/96(H5N1)感染细胞。荧光显微镜判断转染效率，血凝(HA)试验和Real-time RTPCR检测抑制效果。荧光显微镜结果表明，重组质粒转染效率达60％；试验血凝(HA)试验结果表明，重组质粒均能抑制流感病毒的复制，以pcDNA6.2/PA+NP+PB2的抑制效果最佳，它们抑制流感病毒增殖的能力分别62.5％、50％、62.5％和75％、81％；Real-time RT-PCR结果表明，多个miRNA串联起来比单个miRNA有较高的抑制流感病毒复制的效果。
病毒抑制 miRNA表达 禽流感病毒 翻译抑制子 病毒复制
孟庆文 刘丹 秦红刚 李文超 曲连东
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 农业部实验动物质量监督检验测试中心，黑龙江 哈尔滨 150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 农业部实验动物质量监督检验测试中心，黑龙江 哈尔滨 150001；新疆农业大学 动物医学学院，新疆 乌鲁木齐 830052
国内会议
中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会
北京
中文
4-8
2008-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）