猪轮状病毒OSU强毒株vp7基因的克隆及其抗原表位原核表达和免疫学活性分析

摘要：

参照GenBank中所收录的猪轮状病毒OSU株序列设计了一对特异性引物，RT-PCR扩增出1062bp的vp7全长基因，与参考OSU序列的核苷酸同源性达99.8％，克隆到pMD18-T载体中，获得pMD18-T-VP7阳性质粒。以阳性质粒为模板，利用引入BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点的表达引物进行PCR扩增得到含有VP7中和抗原表位区域639bp的基因片段，定向克隆到表达载体pGEX-6P-1中，经酶切PCR鉴定的阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG(终浓度为1.0mmol/mL)37℃诱导4h后，SDS-PAGE电泳显示表达了大小约50ku带GST标签的融合蛋白，薄层扫描显示表达蛋白量占菌体总蛋白的33.2％。Western blot分析表明该VP7重组蛋白可与PRV阳性血清特异性反应。

关键词： 猪轮状病毒 vp7基因 原核表达 免疫学活性

作者: 时洪艳 冯力 陈建飞 孙东波 吴波平

作者单位: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/ 猪传染病研究室， 黑龙江 哈尔滨 150001；东北农业大学，黑龙江 哈尔滨 150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/ 猪传染病研究室，黑龙江 哈尔滨 150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/ 猪传染病研究室，黑龙江 哈尔滨 150001；东北农业大学，黑龙江 哈尔滨 150030

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 184-187

在线出版日期: 2008-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）