小鼠Ii基因克隆、表达及其抗体制备

摘要：

为获取小鼠Ii编码基因，利用原核表系统进行诱导表达，提取与纯化目的蛋白，并制备其相应抗体。应用RT-PCR获取小鼠Ii编码基因；插入pGEX-4T-1表达载体，SDS-PAGE分析蛋白表达；纯化融合蛋白，免疫家兔，制备抗血清。扩增出了与预期大小相同的700bp的特异性基因条带，其与GenBank登录的鼠Ii同源性高达99.2％～99.8％；SDS-PAGE检测到大小约49.5kd的特异性蛋白条带；应用琼脂双向免疫扩散、间接ELISA、Western blot、间接免疫荧光法等进行抗体活性鉴定，证明获得了特异性强、具有良好生物活性的抗体。本试验为内源性靶向Th细胞表位疫苗、肿瘤的免疫与治疗及Ii在免疫应答中的促进作用奠定了一定基础。

关键词： Ii基因 抗体制备 诱导表达 原核表系统 免疫荧光法 免疫应答

作者: 董林 王艳萍 沈志强 余为一

作者单位: 山东省滨州市畜牧兽医研究院，山东 滨州 256600；安徽农业大学动物科技学院，安徽 合肥 230036 山东省滨州市畜牧兽医研究院，山东 滨州 256600 安徽农业大学动物科技学院，安徽 合肥 230036

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 415-417,419

在线出版日期: 2008-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）