会议专题

含MDV gB CTL表位与鸡HSP108融和蛋白基因的合成及原核表达

为了进行新型MD疫苗的开发,开展了融合蛋白基因合成的工作。利用RT-PCR从鸡肝脏中,扩增出约2.4ku的鸡HSP108基因,测序比较发现该基因的序列与GenBank上发表的序列的同源性约为99%。在体外,将MDV gB CTL表位与鸡HSP108融合在一起,构建融合蛋白基因gBHSP108,将该融合蛋白基因克隆入原核表达载体pET-28a中,构建重组表达载体pET-gBHSP108,将该重组载体转化E.coli BL21,经1.0mmol/LIPTG诱导,SDS-PAGE分析发现,外源基因以包涵体的形式获得高效表达。将包涵体溶解于8 mol/L的尿素中,利用His·Bind试剂盒获得纯化的蛋白。Westernblot分析表明,针对MDV gB CTL表位的多抗可以与融合蛋白发生特异性的反应,说明该融合蛋白获得了成功表达。本研究为下一步探讨该融合蛋白的免疫学作用以及该融合蛋白基因的真核表达奠定基础。

CTL表位 原核表达 鸡融合蛋白基因 热休克蛋白 MD疫苗 免疫学作用

邱亚峰 葛菲菲 曹瑞兵 周斌 马志永 陈溥言

中国农业科学院上海兽医研究所 兽医公共卫生实验室,上海 200241 上海市动物疫病预防控制中心,上海 201103 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏 南京 210095 南京农业大学 农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏 南京 210095

国内会议

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

北京

中文

24-27,35

2008-07-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)