共表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白和猪瘟病毒E2蛋白的“自杀性”DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答
为了获得新型双价“自杀性”DNA疫苗，将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV)GP5基因克隆于此前构建的表达猪瘟病毒(Classical swine fever virus，CSFV)E2基因的甲病毒复制子载体疫苗pSFV1CS-E2中。为了增强免疫效果，在密码子优化的GP5基因中插入了泛DR表位（PADRE），在CSFV E2基因后融合伪狂犬病病毒(PrV)UL49基因，获得了6种重组质粒。间接免疫荧光试验显示，PRRSV GP5和CSFV E2基因在瞬时转染的293T细胞中得到同时表达。将6种重组质粒和空载体pSFV1CS分别免疫BALB/c小鼠，用间接ELISA方法检测血清抗体水平，通过基于CSFE/WST-8的淋巴细胞增殖试验和细胞因子ELISA评价疫苗诱导的细胞免疫。结果显示，除pSFV1CS组外，从各疫苗组小鼠血清中均可检测到低水平的针对GP5和E2蛋白的抗体；各疫苗组小鼠脾细胞经CSFV和PRRSV刺激后均能诱导特异性的淋巴细胞增殖；部分疫苗组小鼠脾细胞经CSFV和PRRSV刺激后可分泌较高水平的IFN-γ和IL-4；引入UL49的疫苗组细胞免疫应答显著高于其它疫苗组。这表明，这些共表达GP5和E2蛋白的自杀性DNA疫苗可以诱导体液免疫和细胞免疫，PrV UL49可以增强其细胞免疫应答。
DNA疫苗 猪繁殖 呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 VP22转导蛋白 GP5蛋白 E2蛋白 免疫应答
孙建富 仇华吉 赵和平 李娜 孙元 夏照和 周艳君 王煜 祁巧芬 鲁承
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室，黑龙江 哈尔滨 150001；延边大学农学院动物医学系，吉林 龙井 133400 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室，黑龙江 哈尔滨 150001 延边大学农学院动物医学系，吉林 龙井 133400
国内会议
中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会
北京
中文
463-467,471
2008-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）