猪圆环病毒1型感染性克隆的构建与病毒拯救
用PCR法扩增猪圆环病毒1型(PCV1)全长基因组，将2个基因组顺式连接插入到pUC19质粒载体中构建感染性分子克隆。通过引物设计替换碱基，在病毒基因组内插入SalⅠ酶切位点作为分子靶标，拯救出带有分子标记的克隆病毒，命名为recPCV1/G株。通过免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)在病毒感染细胞中检出病毒抗原，其抗原性仅与PCV1/Cap蛋白单价特异性抗体发生反应，而与抗PCV2/Cap蛋白抗体无交叉。克隆毒株基因组内插入一个SalⅠ酶切位点，可用PCR结合限制性片断长度多态性分析法(PCR-RFLP)与亲本病毒相鉴别。该毒株经细胞连续传10代，体外培养增殖性能稳定，病毒滴度达104.8TCID50/mL。构建的PCV1感染性克隆，为今后开展该病毒的起源与演化、遗传变异规律、分子鉴别诊断等研究奠定了基础。
猪圆环病毒1型 感染性克隆 病毒拯救 PCR法 病毒抗原 遗传变异规律
刘长明 危艳武 陆月华 张朝霞 袁婧 黄立平
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/ 猪传染病研究室，黑龙江 哈尔滨 150001
国内会议
中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会
北京
中文
154-157
2008-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）