会议专题

猪圆环病毒2型Cap蛋白与白细胞介素-2重组腺病毒的构建与鉴定

猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)是近年来新发现的引起仔猪多系统衰弱综合症的必需病原,含有两个主要的阅读框ORF1和ORF2,分别编码复制相关蛋白(Rep)和核衣壳蛋白(Cap),其中Cap含有病毒主要抗原表位,是研究PCV2基因工程苗的主要候选目的基因。IL-2是重要的细胞因子佐剂,能够增强疫苗的免疫效果。本研究利用PCR技术将PCV2 Cap蛋白基因和IL-2-Cap串联基因分别克隆入人5型腺病毒穿梭载体(pShuttle-CMV),与腺病毒骨架载体(pAdEasyTM)共转化大肠杆菌BJ5183进行同源重组并转染HEK-293A细胞,经多次亚克隆获得了重组腺病毒rAd-Cap和rAd-IL-2-Cap。测定其TCID50为1010.6/mL,1010.2/mL。利用RT-PCR、IFA、间接ELISA、Wester blot等方法以及IL-2ELISA试剂盒分别检测猪圆环病毒2型Cap蛋白和IL-2的体外表达情况,结果证明了两基因在腺病毒中获得了表达。该研究为发展PCV2的重组腺病毒基因工程疫苗奠定了基础。

Cap蛋白 重组腺病毒 猪圆环病毒2型 PCR技术 白细胞介素-2

潘群兴 何孔旺 王永山 黄克和

江苏省农业科学院 兽医研究所,江苏 南京 210014 南京农业大学,江苏 南京 210095

国内会议

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

北京

中文

149-153

2008-07-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)