猪流感病毒HA基因原核表达及其初步应用

摘要：

利用RT-PCR方法扩增猪流感病毒A/Swine/Henan/11/2005(H1N1)HA基因，克隆于PMD18-T载体进行测序。以PMD18-HA为模板、利用带酶切位点的引物再次扩增HA基因的开放阅读框(ORF)，克隆到表达载体pET32a中，经双酶切、测序及PCR鉴定得到阳性重组表达质粒pET-HA，将质粒转化到表达宿主菌BL21(DE3)中，经终浓度为1mM的IPTG诱导，SDS-PAGE结果显示，HA蛋白获得了高效表达，经Western blot检测证实表达产物具有良好的免疫学活性，经间接ELISA预试验表明具有良好的抗原反应性。本研究为以重组HA蛋白为抗原建立H1亚型猪流感抗体的ELISA检测方法奠定了基础。

关键词： 猪流感病毒 HA基因 原核表达 RT-PCR方法

作者: 陈艳 乔传玲 丁选亚 杨焕良 辛晓光 韩庆功 陈化兰

作者单位: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/ 农业部动物流感重点开放实验室，黑龙江 哈尔滨 150001

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 136-139

在线出版日期: 2008-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）