猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用
利用纯化的重组杆状病毒表达猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白作为检测抗原，建立一种间接ELISA方法用于血清抗体检测。昆虫细胞株(Sf-21)接种重组杆状病毒，对蛋白表达参数及纯化工艺进行了优化。制备了5批重组蛋白抗原，表达量占总蛋白的18.7％左右；Ni2＋亲和层析柱纯化获得重组蛋白纯度为90.1％；重组蛋白可被特异性抗体识别，具有良好的免疫活性。用建立的ELISA法对30份已知阴性血清样本检测临界OD405nm值为0.343；ELISA与IPMA对150份血清进行平行检测符合率为95.3％(143/150)，特异性为91.2％(31/34)，敏感性为96.5％(112/116)；与其他几种常见猪病毒参考血清无交叉。组装的试剂盒批内和批间变异系数分别为4.0％～4.8％和8.9％～9.9％；置-20℃保存12个月稳定。试剂盒对人工感染猪血清检测结果，接种后第5周抗体阳转，第8～9周抗体水平达到高峰；对来自黑龙江、吉林、河北、上海等地猪场1085份血清抗体检测，阳性率为73.6％。研制的ELISA试剂盒为临床PCV2血清抗体检测及疫苗免疫效果的评价提供了技术手段。
猪圆环病毒2型 重组蛋白 检测试剂盒 ELISA抗体 Cap蛋白 检测抗原
张朝霞 刘长明 危艳武 袁婧 黄立平
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/ 猪传染病研究室，黑龙江 哈尔滨 150001
国内会议
中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会
北京
中文
355-358
2008-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）