TGEV-PEDV-PRV基因芯片探针的构建

摘要：

将TGEV、PEDV、PRV接种PK15细胞观察细胞病变，将细胞反复冻融三次收获病毒，并对病毒增值纯化。根据GenBank中已发表各病毒基因序列设计特异性引物，以病毒RNA为模板，用RT-PCR方法扩增出TGEV-S、PEDV-M、PRV-VP6基因，相应的片段分别长410bp、501bp、432bp。将扩增的目的基因连接到pMD18-T载体上，经蓝白斑筛选出阳性克隆进行序列测定。用DNAStar工具将其与GenBank上标准代表毒株序列进行了比较。结果显示：通过RT-PCR扩增出TGEV-S、PEDV-M、PRV-VP6基因，所选基因特异性很强，通过序列分析，同源性分别高达96.1％、97.4％、85％，具有高度保守性，表明可以作为芯片探针应用到基因芯片的制备。

关键词： 猪胃肠炎病毒 猪流行性腹泻病毒 猪轮状病毒 S基因 M基因 VP6基因 序列分析 基因芯片探针 PK15细胞 特异性引物

作者: 邓俊花 尹燕博 陈静 单虎 杨瑞梅 秦晓冰 黄绢

作者单位: 莱阳农学院动物科技学院，山东 青岛 266109 山东省畜牧兽医总站，山东济南250022

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 383-386

在线出版日期: 2008-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）