猪圆环病毒2型ORF2/猪白介素2嵌合基因真核表达载体的构建、表达及在小鼠体内的免疫效果研究
为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)核酸疫苗，本研究采用重叠延伸PCR(Splicing by overlap extension-PCR，SOE-PCR)方法通过一基因柔性接头(linker)(G4S)3将PCV2的ORF2全长基因和猪白介素2成熟肽基因(PoIL-2)构建成PCV2-linker-PoIL-2嵌合基因并克隆入pcDNA3.1(+)真核表达载体中；筛选阳性重组表达质粒(rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2)转染COS-7细胞，分别采用PCV2抗原间接免疫荧光试验和PoIL-2蛋白ELISA试验方法检测COS-7细胞中表达的重组融合蛋白(rCap-linker-PoIL-2)生物学活性；提取rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2和只含PCV2ORF2基因的重组表达质粒pcDNA3.1/OFR2(rpcDNA3.1/OFR2)免疫BALB/c小鼠并检测其免疫效果。结果表明：成功构建了PCV2-linker-PoIL-2嵌合基因及其pcDNA3.1(+)重组表达质粒；rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2在COS-7细胞浆内进行了表达，表达的rCap-linker-PoIL-2可分别与抗PCV2和抗PoIL-2蛋白抗血清发生特异性免疫反应，表明rCap-linker-PoIL-2蛋白具有Cap蛋白和PoIL-2蛋白的双重生物学活性；rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2质粒免疫小鼠后可诱导小鼠产生明显的抗PCV2抗体，且其诱导的抗体水平明显高于rpcDNA3.1/OFR2。
猪圆环病毒2型 猪白介素2 嵌合基因 核酸疫苗 免疫效果 真核表达
闫若潜 贾松涛 吴志明 张志凌 张健 赵雪丽
河南省动物疫病预防控制中心，河南 郑州 450008
国内会议
中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会
北京
中文
483-486
2008-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）