基于CFSE染色的猪淋巴细胞增殖试验方法的建立

摘要：

本研究旨在建立一种方便可靠的评价猪细胞免疫水平的试验方法。用浓度分别为3μg/mL、6μg/mL、9μg/mL和12μg/mL的刀豆素A(ConA)刺激经羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色的猪外周血单个核细胞(PBMC)3d、5d和7d，然后用荧光标记的单克隆抗体对CD4+和CD8+细胞进行标记，最后利用流式细胞术分析。结果表明，不同浓度ConA刺激后，猪PBMC增殖能力不同，ConA浓度为6μg/mL时CD4+和CD8+细胞的细胞分裂指数最大，用MTT试验也获得相似结果。对PBMC刺激5d后进行分析相对较好。本研究建立了一种基于活细胞染料CFSE染色的猪淋巴细胞增殖试验方法，该方法可以在单个细胞水平上有效地分析刺激后CD4+和CD8+细胞亚群的增殖水平，进而评价细胞免疫水平。

关键词： 猪淋巴细胞 细胞免疫 CFSE染色 淋巴细胞增殖 试验方法

作者: 赵和平 孙元 袁远 仇华吉

作者单位: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/ 猪传染病研究室，黑龙江 哈尔滨 150001

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 497-501

在线出版日期: 2008-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）