禽呼肠孤病毒δNS和P17非结构蛋白作为ELISA鉴别诊断抗原的研究

摘要：

采用已构建好的PGEX-4T-1-δNS和PGEX-4T-1-P17质粒，原核表达了禽呼肠孤病毒(ARV)的两个非结构蛋白δNS和P17，将这两个蛋白进行包涵体纯化后作为包被用抗原，分别进行间接ELISA，并确定它们的最佳抗原包被浓度分别为9.3μg/mL和11.5μg/mL；一抗血清的稀释度都是1:200；HRP酶标二抗羊抗鸡IgG稀释度为1:5000。初步建立了能检测ARV感染的δNS-ELISA、P17-ELISA方法，此外以δNS、P17两蛋白按以上确定的条件同时包被，建立δNS-P17-ELISA。然后分别用δNS-ELISA、P17-ELISA以及δNSP17-ELISA三种方法对接种过ARV活病毒或灭活疫苗的33份SPF鸡血清进行检测，并分析其检测结果，结果表明以非结构蛋白建立的三种ELISA方法均能区分ARV活病毒感染与灭活疫苗免疫的抗体，进一步对这三种方法进行敏感性、特异性以及Excel分析比较，表明δNS-P17-ELISA方法能更有效的区分ARV感染与灭活疫苗免疫抗体。

关键词： 禽呼肠孤病毒 原核表达 包涵体纯化 非结构蛋白 ELISA方法

作者: 谢芝勋 秦春香 谢丽基 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢志勤

作者单位: 广西兽医研究所，广西 南宁 530001

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 317-320

在线出版日期: 2008-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）