传染性法氏囊病病毒血清2型23/82株VP5蛋白的原核表达及多克隆血清的制备
本实验构建传染性法氏囊病病毒(IBDV)血清2型23/82株非结构蛋白vp5基因的原核表达质粒，在大肠杆菌中进行了有效表达，并制备多克隆血清。利用EcoRⅠ和XhoⅠ双切PUC57-23/82VP5质粒，获得23/82株vp5基因片段，连接到同样处理的原核表达质粒pET-28a，经酶切鉴定获得重组质粒pET28a-23/82-VP5，转化到宿主BL21(DE3)，在IPTG诱导下成功表达融合蛋白，SDS-PAGE和Westernblot表明目的蛋白获得表达，分子量大小为23kDa。利用Ni-NTA柱纯化，复性后免疫8周龄BALB/c小鼠，3次免疫后采血，间接ELISA检测血清抗体效价为1:1×105；Western blot分析能够与纯化蛋白发生特异性反应，具有良好的免疫原性。23/82株VP5蛋白的表达和多克隆血清的制备为研究不同血清型VP5蛋白在致病性中的差异提供有力工具，同时为深入研究VP5蛋白的结构和功能奠定基础。
法氏囊病病毒 原核表达 多克隆血清 VP5蛋白 鸡法氏囊病
秦立廷 祁小乐 高宏雷 高玉龙 王笑梅
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/ 禽传染病研究室，黑龙江 哈尔滨 150001
国内会议
中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会
北京
中文
52-55
2008-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）