抗猪流感病毒H1亚型HA蛋白特异性单克隆抗体的研制

摘要：

本试验构建了H1亚型猪流感病毒A/Swine/Guangdong/LM/2004(H1N1)HA基因表达质粒，基因免疫6～8周龄雌性BALB/c小鼠，加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合。通过ELISA、HI试验筛选阳性克隆。应用ELISA、HI试验和Western blot试验测定McAb的反应性和特异性。共获得3株分泌抗H1亚型猪流感病毒HA蛋白的杂交瘤细胞株，分别命名为8C4、8C6、9D6。McAb腹水ELISA效价在1:16000～1:256000之间；HI效价为1:512～1:256000；对A/Swine/Guangdong/LM/2004的中和效价分别为：10-2.83、10-6.4、10-5.8。Western blot分析结果显示，3株McAb只与H1亚型猪流感病毒HA蛋白反应。HA蛋白特异性McAb的研制为H1抗原变异分析及H1亚型猪流感诊断方法的建立奠定了物质基础。

关键词： 基因免疫 单克隆抗体 血凝抑制 抗猪流感病毒 HA蛋白 诊断方法

作者: 李洪涛 刘明 刘春国 杜金铃 孙恩成 刘洋

作者单位: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/ 农业部动物流感重点开放实验室，黑龙江 哈尔滨 150001；东北农业大学，黑龙江 哈尔滨 150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/ 农业部动物流感重点开放实验室，黑龙江 哈尔滨 150001 黑龙江八一农垦大学，黑龙江 大庆 163319 东北农业大学，黑龙江 哈尔滨 150030

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 476-479

在线出版日期: 2008-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）