拟蜘蛛拖丝蛋白基因人工合成及其真核表达载体的构建

摘要：

根据GenBank上蜘蛛拖丝蛋白基因序列(AY55585和AH015065)、拖丝蛋白基因的结构特点和密码子的简并性，设计378bp的拖丝蛋白基因单体，并对其人工聚合成四聚体。Primer5.0分析结果表明，决定拖丝弹性和抗拉力的氨基酸(Gla和Ala)含量(41.43和18.22)接近天然丝蛋白氨基酸含量(42.81和26.32)；利用Antheprot软件对四聚体编码氨基酸的二级结构预测结果显示，与丝蛋白的氨基酸链相近，由4个相同的部分排列而成，即β-片层(占48％)、12个α-螺旋间隔(占15％)、散在的转角(占12％)和若干不规则卷曲(占25％)。将上述4聚体与改造的pcDNA3.1载体(K2.10启动子)连接构建真核表达载体,并通过PCR和酶切鉴定。 上述结果为进一步开展有关转蜘蛛拖丝蛋白基因在绵羊被毛中表达的研究奠定了基础。

关键词： 拖丝蛋白基因 人工合成 四聚体 真核表达载体 绵羊

作者: 王春生 刘欣 梁洋 安铁洙

作者单位: 东北林业大学生命科学学院,哈尔滨 150040

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十五次学术研讨会

会议地点: 陕西杨凌

会议语种:中文

页码: 122-127

在线出版日期: 2008-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）