鸡CDC25B-mRNA探针制备及CDC25B在鸡十二指肠黏膜的表达
应用RT-PCR方法从鸡胚胎中扩增CDC25B基因片段，将其连接于pGM-Teasy。分别利用pGM-Teasy中T7和SP6启动子及其RNA聚合酶，以线性化的CDC25B/pGM-Teasy为模板转录合成正、反义DIG标记RNA探针。 本试验成功合成地高辛(DIG)标记的CDC25B-mRNA探针。进一步应用原位杂交组织化学方法(in situ hybridization histochemistry，ISHH)，将合成的探针用于探查CDC25B-mRNA在鸡十二指肠黏膜的分布情况。结果表明，成年鸡十二指肠肠腺上皮细胞中有丰富的CDC25B-mRNA的转录。原位杂交阳性产物大部分分布于十二指肠肠腺上皮“干细胞部”和“增生郝”细胞的胞质和胞核中，肠腺基底部由下至上，杂交信号逐渐减弱，至小肠绒毛下部消失，转为阴性。在黏膜肌层以及肌肉层里杂交反应呈阴性。 本研究从基因水平证明了鸡十二指肠黏膜肠腺上皮“干细胞部”和“增生部”细胞中有CDC25B-mRNA的存在，表明该区域有活跃的增殖过程，以补充绒毛上端死亡脱落的细胞。
鸡 十二指肠黏膜 CDC25B-mRNA探针 探针合成 原位杂交
覃君慧 张晖 包慧君 李梅英 初晓红 陈秋生
南京农业大学动物医学院,南京,210095
国内会议
中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十五次学术研讨会
陕西杨凌
中文
138-143
2008-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）