会议专题

棉花SSR标准反应体系的建立

为了建立一套标准的棉花SSR-PCR反应体系,本实验以TM-1和海岛棉海7124为实验材料,探讨了SSR技术中PCR体系的主要成分对扩增结果的影响,对SSR反应体系中的DNA模板浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度、dNTPs浓度以及退火温度进行了探索,确立了适合棉花的SSR反应体系为:10μL的PCR反应体系中,各成分的最佳浓度依次为:dNTP浓度为O.2 mmol·L-7,Taq酶浓度为0.5U,Mg2+浓度为2.5 mmol·L-1,DNA浓度为30~50 ng·μL-1,引物浓度0.7~100/xmol·L-1。退火温度在53~55℃为最佳。并利用该反应体系以10对SSR引物对两个材料进行PCR扩增,用8%的交性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,两个材料间DNA谱带清晰,而且多态性丰富,证实该体系稳定可靠。

棉花 SSR技术 PCR体系 DNA模板 Taq聚合酶 DNA谱带

潘兆娥 杜雄明 孙君灵 周忠丽 贾银华 王艳玲 庞保印

中国农业科学院棉花研究所,河南安阳 455000

国内会议

中国棉花学会2008年年会

陕西杨凌

中文

148-151

2008-08-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)