诱导中性粒细胞凋亡减轻体外循环后肺损伤的体内外实验研究
目的:观察诱导中性粒细胞(PMN)凋亡对体外循环(CPB)后肺脏损伤的保护作用。 方法:在体外实验中,Pereoll细胞分离液梯度密度离心得PMN,培养48小时,实验组加入不同浓度的克拉霉素(5、10、20ug/ml)。台盼蓝染色,镜下观察细胞存活率。流式细胞仪检测细胞凋亡率。免疫组化法观察PMN凋亡相关基因蛋白Fas和bel2的表达情况。在体内实验中。将12只绵羊随机分为2组。A组,低分子右旋糖酐肺动脉灌注;B组,低分子右旋糖酐+克拉霉素肺动脉灌注。建立CPB后经肺动脉灌注肺保护液,CPB90min后撤离CPB。观察呼吸功能,检测细胞因子浓度,并观察肺组织形态学改变及肺内PMN凋亡情况。 结果:克拉霉素明显缩短PMN的生存期,且浓度在10ug/ml以上时,其作用达到最大。流式细胞仪检测结果显示克拉霉素组24小时凋亡率为:1、5、10和20ug组分别为33.7±4.9％、48±4.9％、52±5.4％和53±7.1％,明显高于对照组的31.5±3.5％(P<0.01)。免疫组化染色结果显示实验组Fas的表达较对照组明显增高,而bel-2的表达低于对照组(P<0.01)。体内实验结果显示,肺保护组肺血管阻力(102.2±14.4)低于对照组(202.6±47.1,P<0.01),而动脉血氧(188±48)指数较对照组(123±62,P<0.05)高。肺保护组支气管肺泡灌洗液内细胞因子白细胞介素-8和肿瘤细胞因子均低于对照组(P<0.05)。形态学观察表明保护组肺损伤较对照组轻。对照组肺内中性白细胞凋亡率为29％,保护组凋亡率达73％(P<0.01).两组差异显著。 结论:克拉霉素能诱导PMN凋亡,减轻CPB所造成的肺脏损伤。
中性粒细胞凋亡 体外循环 肺损伤 体内外实验 肺保护 克拉霉素
范祥明 刘迎龙 王强 于存涛 魏波
北京阜外心血管病医院 100037
国内会议
安徽黄山
中文
205-207
2004-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）