利用花粉介导遗传转化获得抗除草剂转基因油菜
农杆菌LBA4404经As活化后,均匀涂布在特定的花粉萌发培养基上。然后在该培养基上均匀散上一层刚收集的油菜(Brassica napus L.)花粉,待其离体萌发后再给去雄植株人工授粉,套袋、收获种子、进行PVT筛选。 结果表明,萌发培养基中的蔗糖浓度明显影响油菜花粉的离体萌发能力、受体的结实率与转化率,浓度梯度为0、10%、15%、20%、25%时,不加蔗糖,绝大多数花粉破裂;20%以下随着蔗糖浓度的增加,花粉破裂率降低、萌发率和结实率明显提高;25%时花粉萌发率虽然有所降低,但结实率最高,为5.29欧粒/荚,PPT筛选和PCR分析结果表明该浓度的处理成功获得了3株转基因油菜,平均转化效率为0.31%。本文首次报道了以农杆菌作为DNA供体,利用花粉介导法转化油菜获得成功。
甘蓝型油菜 根癌农杆菌 花粉介导法 PPT筛选
邹智 吴刚 肖玲 武玉花 卢长明
中国农业科学院油料作物研究所,基因工程与转基因安全室,湖北 武汉 430062
国内会议
福州
中文
78-82
2008-12-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)