His肽修饰的人干扰素γ的研制

摘要：

目的：为了便于人干扰素γ功能研究，制备6His修饰的人干扰素γ。 方法：采用一步反向PCR扩增编码人干扰素γ的cDNA序列,克隆到质粒pUC19,测序鉴定正确后构建到pQE80L表达质粒中，经BamHI和HindⅢ双酶切后，行1.2％琼脂糖凝胶电泳鉴定；利用SDS-PAGE和Western blot 检测表达的目的蛋白，Ni2+-NTA柱纯化蛋白，酶联免疫吸附测定纯化的目的蛋白。 结果:一步反向PCR扩增得到编码人干扰素γcDNA片段，测序结果正确,SDS-PAGE和Western blot分析显示His修饰的人干扰素γ在大肠杆菌中获得了高效表达，SDS-PAGE证实目的蛋白具有较高纯度，酶联免疫吸附测定显示目的蛋白具有高的生物活性。 结论：成功制备了6His肽修饰的人干扰素γ。

关键词： 人干扰素γ 蛋白表达 分离纯化 6His肽修饰 生物活性

作者: 胡大强

作者单位: 第三军医大学大坪医院野战外科研究所药剂科,重庆400042

会议类型: 国内会议

会议名称: 2008中国药学会学术年会暨第八届中国药师周

会议地点: 石家庄

会议语种:中文

页码: 1-3

在线出版日期: 2008-10-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）