溃结灵对溃疡性结肠炎大鼠结肠粘膜Toll样受体2、4 蛋白水平和NF-κB活性的作用

目的:观察溃结灵对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠粘膜Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)蛋白水平和核因子-κB(NF-κB)活性的作用,对其作用机制进行初步探讨。 方法:采用三硝基苯磺酸(TNBS)法制作UC大鼠模型,大鼠随机分为以下六组:正常对照组、模型对照组、溃结灵低剂量组、中剂量组、高剂量组、阳性药SASP组。治疗十天后处死大鼠取结肠粘膜标本并提取全细胞蛋白,运用蛋白免疫印迹(Western blot)方法对TLR2和TLR4的蛋白表达水平进行检测,以β-actin作为内参,以目的蛋白与β-actin密度的比值作为目的蛋白的相对含量并进行统计学分析。另外取新鲜结肠粘膜标本提取核蛋白,利用以ELISA为基础的Trans AM TM NF-κB p65试剂盒检测NF-κB活性并进行统计学分析。 结果:模型组结肠粘膜TLR2、TLR4蛋白相对表达量分别是0.663±0.137和0.843±0.201,均明显高于正常组(分别为0.254±0.052、0.472±0.072,P<0.01);溃结灵中剂量组结肠粘膜TLR2相对表达量为0.472±0.160,明显低于模型组(P<0.05),高剂量组和SASP组结肠粘膜TLR2相对表达量分别为0.376±0.104和0.422±0.085,明显低于模型组(P<0.01);溃结灵高剂量组结肠粘膜TLR4相对表达量为0.620±0.178,明显低于模型组(P<0.05),SASP组结肠粘膜TLR4相对表达量为0.581±0.152,明显低于模型组(P<0.01)。模型组结肠粘膜NF-κB相对活性为0.440±0.119,明显高于正常组(0.261±0.042,P<0.01);溃结灵高剂量组和SASP组结肠粘膜NF-κB相对活性分别为0.261±0.056、0.269±0.106,均明显低于模型组(P<0.01)。 结论:溃结灵对TNBS法UC大鼠模型结肠粘膜TLR2、TLR4蛋白表达有抑制作用,并使TNBS法UC大鼠模型结肠粘膜NF-κB活性明显降低,这可能是其治疗UC作用的机理之一。
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杜群 李红 王汝俊 李燕舞 巫燕莉
广州中医药大学脾胃研究所510405
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2008-11-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)