超嗜热菌Aquifez aeolicus亮氨酰-tRNA合成酶的研究
超嗜热菌Aquifex aeolicus(A.aeolicus)中的亮氨酰-tRNA合成酶(AaLeuRS)是由α和β双亚基组成，目前已知的其它亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)为单亚基酶。在大肠杆菌中分别克隆了α和β亚基的基因，发现α亚基不能以可溶性蛋白质表达；β亚基则可稳定表达，具有耐热性。纯化的β亚基无氨基酰化活力，但可在体内或体外结合tRNALeu。但双亚基基因在大肠杆菌中共表达，可得到纯度为95％以上的酶。基于β亚基和tRNALeu结合的性质我们建立了酵母三杂交系统，通过这一系统鉴定了与tRNALeu结合的酶分子上的重要结构域。 本文介绍了超嗜热菌Aquifex aeolicus亮氨酰-tRNA合成酶的研究概况。发现它可以通过不依赖tRNA的转移前、依赖tRNA转移前和依赖于tRNA转移后的三条编校途径进行编校。用突变的手段分离了两条依赖于tRNA的编校途径。发现它通过分子内结构域间的通讯负反馈氨基酸化活力从而进一步保证遗传的忠实性。
超嗜热菌 亮氨酰 合成酶 酰化活力
王恩多
分子生物学国家重点实验室，中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，上海 200031
国内会议
长春
中文
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2007-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）