TNFRI：IgGFc融合蛋白基因的构建及其在大肠杆菌中的高效表达
目的：获得TNFR：IgGFc融合蛋白，并对其功能进行研究。 方法：以含有信号肽的TNFR和IgGFc融合基因为模板，在上游引物中引入原核细胞高频密码子，PCR扩增去信号肽TNF受体(P55)胞外区和IgGFc融台基因(TNFR：IgGFc)，亚克隆入pUC19载体，经序列测定正确后克隆入原核表达载体pRsetA中。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，实现原核系统表达。通过生化和生物学方法对表达产物进行鉴定。 结果：重组蛋白表达量占菌体总蛋白的25％，免疫蛋白印迹证实为我们所构建了的融合蛋白，ELISA实验表明融合蛋白可与TNF很好的结合，体外的抗TNF细胞毒性活性检测，证明该蛋白可颉抗TNF的毒性作用。 结论：TNFR：IgGFc融合蛋白得到高效表达，获得具有生物学活性的重组蛋白，为深入研究TNFR：IgGFc提供了材料。
肿瘤坏死因子 大肠杆菌 融合蛋白 原核表达 蛋白印迹 生物学活性
祖东 姚立红 陈爱君 朱宏建 刘沐荣 张智清 徐春晓 黄国锦
杭州生物医药孵化器有限公司;中国预防医学科学院病毒所;北京大学泌尿学研究所
国内会议
杭州
中文
427-432
2004-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）