人脑源性神经营养因子成熟肽基因克隆及表达
目的:构建表达人脑源性神经营养因子的基因工程菌。 方法:人工合成一对含EcoRI和BamHI限制性酶切位点的特异引物,以健康成人末梢白细胞基因组DNA作为模板。 应用PCR技术扩增hBDNF成熟肽基因,用A-T克隆法与pUCm-T载体连接,pUCm-T-BDNF克隆片段再定向插入原核表达载体PB V220,构建的重组体PB V220-BDNF转化大肠杆菌DH5a经热诱导表达。 结果:经DNA测序和限制性酶切确证重组入载体片段为目的基因的核苷酸序列,并成功表达蛋白。 结论:本研究成功地克隆出hBDNF基因编码序列并在大肠杆菌中获得稳定表达,为今后的生物学活性和神经系统的基因治疗奠定了基础。
脑源性神经营养因子 基因表达 基因工程菌 原核表达 生物学活性 基因治疗 核苷酸
张虎 杨吉成 盛伟华 缪竞诚 李丽娥 王金志 白艳艳 谢宇锋
苏州大学医学院基础医学系细胞与分子生物学教研室,江苏,苏州 215007
国内会议
杭州
中文
374-377
2004-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)