幽门螺杆菌内置佐剂UreB和HpaA双价重组疫苗对实验感染小鼠的免疫保护作用
目的：了解内置重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(rLTB)佐剂、幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)尿素酶B亚单位(rUreB)和粘附素(rHpaA)双价基因工程疫苗对Hp SS1株感染BALB/c小鼠的保护作用及其机制。 方法：采用NTA-Ni亲和层析法分别收集rUreB、rHpaA、rLTB-rUreB-rHpaA、重组大肠杆菌不耐热肠毒素A亚单位突变体(rLTKA63)、rLTB和霍乱肠毒素B亚单位(rCTB)。用Westernblot检测各重组蛋白抗原的免疫反应性。用GM1-ELISA检测rLTB、rCTB、rLTB-rUreB-rHpaA的佐剂活性。建立Hp SS1株感染BALB/c小鼠模型，检测不同组合抗原和佐剂的免疫保护效果。采用分离培养和镀银染色法检查感染小鼠胃窦组织中的Hp。建立ELISA分别检测免疫小鼠特异性胃液S-IgA和血清IgA。 结果：rUreB、rHpaA和rLTB-rUreB-rHpaA可被兔抗Hp全菌抗体能识别并能与牛GM1结合。单用rUreB或rHpaA免疫，其保护率低于70％；若与rLTB或rCTB合用时，其保护率可增至75.0％-83.3％。不同抗原及佐剂组合中，rLTB-rUreB-rHpaA保护率可达100％，其次为rHpaA+rUreB+rCTB+rLTKA63(91.7％)和rUreB+rHpaA+rLTB(90.9％)。 rLTB和rCTB均有明显的诱生免疫小鼠特异性血清IgA和胃液S-IgA作用，但前者诱生S-IgA的能力强于后者。特异性血清IgA、尤其是胃液S-IgA的阳性率与小鼠免疫保护率基本吻合，rLTB-rUreB-rHpaA免疫小鼠rUreB和rHpaA特异性S-IgA阳性率分别高达100％和91.7％。 结论：rUreB和rHpaA有良好的免疫反应性和抗原性，rLTB和rCTB有粘膜免疫佐剂活性。 内置佐剂UreB和HpaA双价重组疫苗对小鼠高保护率与使用高剂量rLTB、抗原分子量增大和局部高水平特异性S-IgA抗体有关。
幽门螺杆菌 基因工程疫苗 动物模型 免疫保护 尿素酶
严杰 徐飏 毛亚飞 李淑萍
浙江大学医学院病原生物学教研室;华中科技大学同济医学院病原生物学系
国内会议
杭州
中文
308-317
2004-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）