人Epsilon干扰素(hIFN-ε)的基因克隆和表达
目的:构建表达hIFN-ε基因的真核表达载体,并在COS-7细胞中表达具有抗病毒活性的rhIFN-ε蛋白。 方法:用TNFα刺激HeLa人宫颈细胞,抽提总RNA,经RT-PCR获得全长cDNA,与pcDNA3.1/myc-his(-)A真核表达载体连接,构建重组体pcDNA3.1A-hIFN-ε,并在COS-7细胞中进行表达,采用微量细胞病变抑制试验研究表达产物的抗病毒活性。 结果:经PCR和限制性酶切鉴定以及DNA测序确证重组入载体中的基因片段不仅方向正确,而且确为hIFN-ε,与GeneBank报告序列完全—致,并成功地在COS-7细胞中瞬时表达了具有抗病毒活性的rhIFN-ε蛋白。 结论:本研究成功地克隆出hIFN-ε基因编码序列并在COS-7细胞中获得瞬时表达,证明了rhIFN-ε蛋白具有抗病毒活性,为今后干扰素的基因重组药物研制奠定了基础。
基因克隆 基因表达 真核表达 抗病毒活性 干扰素 基因重组
马丽丽 盛伟华 谢宇锋 缪竞诚 王金志 庄文卓 李丽娥 杨吉成
苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室 215007
国内会议
杭州
中文
194-199
2004-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)