产丁二酸工程菌的构建及其厌氧发酵
为了考察过量表达苹果酸酶对于E.coli NZNl11(1dhA::Kan pfl::Cam)厌氧发酵产丁二酸的影响,将连接有苹果酸酶基因sfcA的表达载体pTrc99a-sfcA转化进NZNl11中,构建了重组NZNl11(pTrc99a-sfcA).0.5mmol/l IPTG诱导8h后,测定的苹果酸酶比酶活为30.67u/mg,比受体菌提高了140倍.采用两阶段发酵模式,结果表明:过量表达的苹果酸酶在NZNl11体内催化了从丙酮酸到苹果酸的逆向反应,丁二酸是发酵过程中积累的主要有机酸,且当加入0.7mmol/L IPTG诱导,初始葡萄糖糖浓度为18.5g/l时,选择对数生长期后期的菌种以10％的接种量转入厌氧发酵,发酵结束时发酵液中丁二酸的浓度为12.84g/l,对葡萄糖的收率为69.43％,乙酸为0.58g/l,二者浓度比为22:1,没有检测到甲酸和乳酸.构建的菌种具有高产丁二酸和副产物板少的优点,在同类菌种中处于先进水平.
苹果酸酶 两阶段发酵 逆向催化 丁二酸
谢鑫 陈可泉 刘忠敏 姜岷 韦萍
南京工业大学制药与生命科学学院 材料化学工程国家重点实验室,南京 210009
国内会议
银川
中文
94-99
2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）