猪细小病毒LXB-PPV-20-06株NS1基因的原核表达及免疫活性的鉴定
利用PCR技术扩增PPV LXB-PPV-20-06株NS1基因全序列,将目的基因与原核表达载体pET-32a(+)进行连接并转化,重组质粒经PCR和双酶切鉴定并测序.测序结果表明,目的基因正确地插入到重组质粒当中.通过对表达宿主菌的选择,PPV LXB-PPV-20-06株NS1基因在Rosetta(DE)plysS菌中的到良好的表达,并确定了NS1基因的最佳诱导条件:IPTG终浓度为0.6mmol/L、诱导时同为3.5h、诱导温度为37℃.表达产物经SDS-PAGE分析,得到分子量约为97kDa的重组蛋白,除了包涵体形式表达外,—部分重组蛋白以可溶性形式表达.重组蛋白经Westernblot检测,可与PPV阳性血清反应.这为NS1蛋白在临床诊断中的应用打下基础.
猪细小病毒 LXB-PPV-20-06株 NS1基因 原核表达
戚亭 崔尚金 张超范
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室 猪传染病研究室,黑龙江 哈尔滨 150001
国内会议
大连
中文
547-550
2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）