共表达PRRSV修饰的GP5与M蛋白的重组改良型痘苗病毒安卡拉株的构建及免疫效力
将PRRSV修饰的ORF5(MORF5)与ORF6基因分别克隆入笔者构建的改良型痘苗病毒安卡拉株(Modified vaccinia virus ankara,MVA)转移载体pLR-gpt的两个多克隆位点中,构建重组转移载体pLR-MORF5/ORF6.经脂质体介导,将构建好的重组转移载体转染感染亲本MVA 2h的BHK-21细胞单层,用药物选择性培养基(MXHAT)在24孔板上进行连续筛选纯化,得到带有筛选标记的重组病毒.将rMVAgpt-MGP5/M感染表达Cre重组酶的BHK-21细胞(BHK-Cre),获得删除筛选标记的重组病毒.PCR证明MORF5与ORF6成功插入MVA基因组中:Western-blot与IFA证明重组病毒能表达MGP5与M蛋白:重组病毒的生长特性表明与亲本MVA出现病变的时间及病毒滴度基本一致.用rMVA-MGP5/M免疫6周龄Babl/C小鼠,首免后3周可检测到特异性PRRSV中和抗体,8周后中和抗体效价可达25,并能继续维持4周:细胞因子检测结果表明,重组病毒免疫小鼠产生强烈的TH1型细胞免疫反应.结论:rMVA-MGP5/M具有良好的免疫原性,可作为预防PRRS的候选疫苗进一步研究.
猪繁殖与呼吸综合征 改良型痘苗病毒 安卡拉株 重组病毒 免疫原性
郑其升 邓碧华 曹瑞兵 王继春 候继波 陈溥言
江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏 南京 210014 南京农业大学动物医学院,江苏 南京 210095
国内会议
大连
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233-239
2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）