欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性cDNA克隆的构建
为了获得欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)弱毒疫苗AMERVAC-PRRS/A3株的病毒基因组感染性cDNA克隆,为研究深入欧洲型PRRSV提供工具,通过RT-PCR技术扩增了欧洲型PRRSV活疫苗AMERVAC-PRRS/A3弱毒株的全基因组,并测序.根据测序结果,选择合适的酶切位点将各个亚克隆产物逐段克隆入改造过的pBluescript Ⅱ KS(+)载体中,从而获得了病毒基因组全长cDNA克隆,并使其置于T7启动子的控制之下,同时在病毒基因组cDNA的ORF7和3”UTR之间引入了标记位点.通过体外转录合成病毒基因组RNA转染Marc-145细胞,该病毒基因组全长cDNA克隆能够从Marc-145细胞中成功拯救出病毒,拯救病毒的生物学特征与其亲本病毒基本一致.结果表明,本试验成功构建了欧洲型PRRSV感染性cDNA克隆.
欧洲型PRRSV 基因组 cDNA克隆 感染性
庄金山 张建武 袁世山
中国农业科学院上海兽医研究所/中国动物卫生与流行病学中心上海分中心 动物传染病研究室 农业部动物寄生虫病重点实验室 上海 200232
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202-206
2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）