活血注射液对OX-LDL诱导人脐静脉内皮细胞活化和黏附作用的影响
目的：观察活血注射液对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HuVEC)的细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)的表达及与人单核细胞粘附作用的影响，并探讨核转录因子ka：ppa B(NF-kB)在其中的调控作用。 方法：以培养人脐静脉内皮细胞(HUVE(：)作为靶细胞，在内皮细胞培养基中加入氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)制备细胞损伤模型。以MTT法检测经不同浓度活血注射液处理214 h后HUVEC活性的变化，并确定活血注射液的高、中、低浓度；采用蛋白定量法检测HUVEC与单核细胞的粘附率；逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HUVEC的ICAM-1和VCAM-1的mRNA表达；用流式细胞仪测定HUVEC的ICAM-1和VCAM-1的蛋白表达；用免疫细胞化学法和图象定量分析系统测定内皮细胞中NF-kB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值。 结果：5.00-40.00 mL·L-1的活血注射液可明显提高HUVEC的生长活性。ox-LDL作用HUVEC后12、24h时，人单核细胞与HUVEC的粘附率显著升高，HuVEC中ICAM-1和VCAM-1的mRNA和蛋白表达水平也均明显升高，均明显高于正常对照组(P<0.05，P<0.01)，ox-LDL作用HUVEC后24h时，内皮细胞NF-kB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值明显增高，明显高于正常对照组(P<0.05，P<0.01)，而活血注射液可明显降低人单核细胞与HUVEC的粘附率和HUVEC ICAM-1和VCAM-1的mRNA和蛋白表达水平，以及显著降低HUVEC中NF-kBp65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值，与ox-LDL组相比均有显著性差异(P<0.05，JP<0.01)，这种作用随着剂量的增加而增强。 结论：活血注射液在一定浓度范围内可增强HUVEC的生长活性。活血注射液能通过下调内皮细胞表面ICAM-1和VCAM-1的mRNA和蛋白表达抑制单核-血管内皮细胞粘附，其可能机制是其通过抑制内皮细胞NF-kB p65的活性，从而发挥对血管内皮细胞的保护作用，有利于减少或抑制动脉粥样硬化的形成。
血管内皮细胞 单核细胞 细胞粘附分子 核转录因子kappa B 活血注射液
朱陵群 王硕仁 赵明镜 牛福玲 崔巍
北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点试验室、北京市重点实验室、气血研究实验室 北京 100700
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上海
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377-382
2008-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）